بیان ژن FSH انسانی در سلول تخمدان همستر چینی و بررسی فعالیت آن در مدل حیوانی رت

Authors

  • تیموریان, شهرام گروه ژنتیک ﭘزشکی و زیست شناسی مولکولی دانشگاه علوم ﭘزشکی ایران، تهران، ایران
  • رسولی, ایرج گروه زیست شناسی میکروبیولوژی دانشگاه شاهد، تهران، ایران
  • رضایی, مریم گروه ژنتیک ﭘزشکی و زیست شناسی مولکولی دانشگاه علوم ﭘزشکی ایران، تهران، ایران
  • شهابی یونسی, امیرحسن گروه داروسازی دانشگاه شهید بهشتی،تهران، ایران
  • موسیوند, اعظم گروه میکروبیولوژی دانشکده علوم پایه دانشگاه شاهد، تهران، ایران
Abstract:

Background and Objective: FSH is a heterodimeric glycoprotein that performs an important role in the regulation of reproductive processes. Over the past decades, injectable gonadotrophins have played a leading role in the treatment of infertility. The production of FSH in the country is one of the main goals around this drug. The aim of this study was to produce a semi- industrial recombinant FSH.   Materials and Methods: In this research study, the FSH gene contained within the pVITRO2-neo-mcs vector was transfected into the cell line of CHO after transformation in DH5α and plasmid purification. The amount of FSH in cell supernatant was measured by ELISA. The FSH protein was purified by HPLC. The presence of FSH protein after purification was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting methods. Finally, the clinical effects of purified FSH on the ovary in the rat model were investigated.   Results: The expression of the protein was determined by ELISA test at 450 nm that was 43.538 mIU/ml. In the HPLC purification step, the FSH peak was observed at a time interval of about 7.9 minutes, and the purification efficiency was 70%. The existence of a 45 KDa band on the pvdf membrane was confirmed after western blotting of FSH.  Increasing the weight of the ovary after the injection has confirmed the functionality of the protein.   Conclusion: At present, the production of recombinant hormone is one of the basic needs of every country. In order to arrive at this aim, a long-term planning is required. We are trying to pave the way for producing human FSH hormone as an effective recombinant drug in the treatment of infertility.  

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان ژن leoA هلیکوباکترپیلوری در سلول‌های تخمدان همستر چینی به روش RT-PCR

زمینه و هدف : عفونت هلیکوباکترپیلوری یکی از شایع‌ترین عفونت‌های مزمن باکتریایی در جهان به‌ویژه در کشورهای در حال توسعه است. ژن leoA نقش مهمی در بیماری‌زایی ایفا می‌کند و نقش اصلی این ژن افزایش ترشح سم توسط باکتری است. این مطالعه به منظور جداسازی و کلون‌سازی ژن leoA در وکتور بیانی pEGFP-C2 و بررسی بیان آن به روش RT-PCR در سیستم یوکاریوتی انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی ژن l...

full text

بهینه سازی بیان ژن کدکننده هورمون محرک فولیکولی انسانی ( fsh ) از طریق تغییر کدون ها در سلول های تخمدان همستر چینی (cho)

هورمون محرک فولیکولی (fsh) یک هورمون گلیکوپروتئینی است که از غده ی هیپوفیز پیشین ترشح می شود. این هورمون با تحریک تخمک گذاری در زنان و کمک به روند اسپرماتوژنز در مردان نقش مهمی را در تولیدمثل و باروری ایفا می کند. امروزه به علت خلوص بالا و ایمن بودن پروتئین های نوترکیب، تنها از این نوع fsh برای مصارف درمانی استفاده می شود. با توجه به پایین بودن میزان بیان پروتئین ها در لاین های سلولی پستانداران...

کلون سازی و بیان ژن هورمون لوتئینه کننده ی انسانی (hlh) در سلول های تخمدان همستر چینی

هورمون های گنادوتروپینی از جمله هورمون لوتئینه کننده ( lh) به خانواده ی هورمون های گلیکو پروتئینی تعلق دارند، این هورمون های گلیکوپروتئینی مولکول های هترودایمری هستند که از دو زیرواحد متفاوت به نام زیرواحد عمومی ? و زیر واحد اختصاصی ? تشکیل شده اند و به طور غیر کووالانت و با پیوندهای هیدروژنی و واندروالسی به هم متصل اند. بخش کربوهیدراتی هورمون های گلیکوپروتئینی مهم ترین نقش را در پتانسیل زیستی ...

15 صفحه اول

تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب توسط سلول تخمدان هامستر چینی و بررسی فعالیت زیستی آن به روش سنجش گزارشگر ژنی

 Background: Cultivated mammalian cells, because of their capacity for proper protein folding, assembly and post–translational modification, have become the dominant system for production of recombinant proteins in clinical application. Therefore, the quality and efficacy of protein can be superior when expressed in mammalian cells compared to other hosts such as bacteria. Gene reporte...

full text

بهینه سازی بیان هورمون محرک فولیکولی انسانی در سلول های تخمدان همستر چینی بوسیله ی بهینه سازی شرایط محیط کشت

هورمون محرک فولیکولی انسانی، یکی از اعضای خانواده ی هورمونهای گنادوتروپینی است. این هورمون گلیکوپروتئینی مانند دیگر اعضای این خانواده، ماکرومولکولی هترودایمر است که از دو زیرواحد تشکیل شده است. زیرواحد عمومی مشترک در تمام اعضای این خانواده و زیر واحد دیگر نامیده می شود. این هورمون بطور طبیعی در باروری زنان و مردان نقش دارد و به عنوان دارو در درمان ناباروری بطور گسترده ای استفاده می گردد. تولید ...

15 صفحه اول

بهینه‌سازی کدون ژن فاکتور سلول‌های بنیادی (SCF) و ارزیابی بیان این ژن با کمک وکتور pBudCE4.1 در سلول‌های تخمدان همستر چینی (CHO)

زمینه و هدف: فاکتور سلول بنیادی (SCF) یک سایتوکاین خونی است که می‌تواند از طریق تأثیر بر روی سلول‌های مولد خون‌ساز در تمایز سلول‌های پیش‌ساز خونی، بقاء، تکثیر و تمایز ماست سل‌ها و همچنین افزایش تکثیر و تهاجم سلول‌های توموری بااهمیت باشد و نقش درمانی آن در بهبود بیماری‌هایی نظیر آلزایمر و سکته‌های قلبی در حال بررسی و تحقیق است. هدف از این تحقیق کلون‌سازی ژن SCF به‌وسیله حامل بیانی pBudCE4.1 با ب...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 26  issue 139

pages  1- 8

publication date 2019-03

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023